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Tecniche Biologiche
0 visualizzazioni • 3:03 min. • July 8th, 2025
L'omeostasi cellulare delle proteine, o proteostasi, coinvolge la regolazione del ripiegamento e della funzione delle proteine, insieme alla degradazione delle proteine mal ripiegate. Durante l'invecchiamento, il meccanismo della proteostasi diminuisce, causando l'accumulo e l'ulteriore aggregazione di proteine mal ripiegate, con conseguente disfunzione cellulare.
Per determinare il declino della proteostasi associata all'età, iniziare con Caenorhabditis elegans transgenico adulto sincronizzato con lo sviluppo.
Le cellule muscolari di questi vermi esprimono proteine con ripetizioni di poliglutammina anormalmente espansa, o polyQ, fuse con un tag fluorescente. Le proteine PolyQ sono inclini a ripiegarsi male e, quindi, dopo l'accumulo, possono formare aggregati.
Trasferire i vermi su un vetrino da microscopio composto da un tampone di agarosio e immobilizzarli con un prodotto chimico adatto per l'imaging di cellule vive. Utilizzando un microscopio a fluorescenza, visualizzare i muscoli della parete corporea dei vermi per un periodo di tempo per determinare i segnali luminosi e fluorescenti, corrispondenti agli aggregati polyQ fluorescenti.
Entro pochi giorni, a causa del declino del
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