Saggio di co-incubazione batterica: una tecnica basata sulla microscopia a fluorescenza per visualizzare la competizione batterica intraspecifica a livello di singola cellula

0 visualizzazioni • 3:55 min. • July 8th, 2025

La competizione intraspecifica tra due ceppi batterici fa sì che il ceppo inibitore rilasci molecole effettrici tossiche che uccidono la popolazione bersaglio.

Per visualizzare le interazioni competitive tra due ceppi batterici gram-negativi, iniziare con una co-coltura comprendente un inibitore e un ceppo bersaglio in quantità uguali.

Entrambi i ceppi sono progettati per esprimere proteine fluorescenti di colore diverso per differenziarle visivamente durante l'imaging. Concentrare la coltura per massimizzare il contatto cellula-cellula tra i ceppi batterici. Individua la coltura mista su un vetrino coprioggetti posto sul fondo di un piatto.

Posiziona un tampone di agarosio solidificato sul punto, permettendo ai batteri di immobilizzarsi, e coprilo con un altro vetrino coprioggetti. Incubare per consentire la crescita batterica, simulando le condizioni di affollamento batterico.

L'involucro cellulare del ceppo inibitorio contiene un sistema secretorio specializzato: il sistema di secrezione di tipo sei, o T6SS. Comprende un complesso di membrane, una piastra di base e un tubo interno circondato da una guaina contrattile.

Dopo aver rilevato il contatto, il ceppo inibitore attiva il

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Sistema di secrezione di tipo sei