Saggio della placca virale: una tecnica per misurare il virus infettivo dell'herpes simplex attraverso la quantificazione delle placche formate nel monostrato di cellule infettate da virus

Per iniziare, preparare diluizioni seriali del virus dell'herpes simplex, un virus infettivo avvolto, in tampone.

Ottenere una piastra a più pozzetti contenente un monostrato di coltura di cellule epiteliali sensibili al virus. Sostituisci il volume specifico dei terreni con sospensioni virali diluite, garantendo una copertura uniforme del monostrato. Lasciare che il virus si adsorba sulla superficie cellulare.

Rimuovere eventuali virus non adsorbiti. Coprire il monostrato cellulare con mezzi contenenti metilcellulosa, formando un rivestimento semisolido.

Dopo l'incubazione, l'involucro virale e la membrana cellulare si fondono, rilasciando il nucleocapside virale che racchiude il genoma a doppio filamento nel citoplasma. Inoltre, il genoma virale viene rilasciato nel nucleo cellulare.

Utilizzando il macchinario cellulare dell'ospite e la proteina del virione, il genoma virale esprime immediatamente le proteine virali precoci, che regolano l'espressione dei geni precoci. Le proteine virali precoci mediano la replicazione del DNA virale.

Quindi, i geni virali tardivi esprimono proteine strutturali, che insieme al genoma virale si assemblano per produrre particelle di virione progeni