Saggio della ferita per valutare la capacità migratoria dei mioblasti murini in co-coltura

In risposta a una ferita, le cellule secretorie producono molecole di segnalazione paracrina per attivare i mioblasti, le cellule muscolari indifferenziate. I mioblasti attivati migrano verso il sito della ferita, dove proliferano, provocando la guarigione della ferita.

Per valutare la capacità migratoria dei mioblasti in vitro, prelevare una piastra multipozzetto contenente un monostrato confluente di mioblasti murini. Utilizzando la punta di una pipetta, grattare il monostrato per creare un cerotto lineare e privo di cellule all'interno del pozzetto, che simula il sito della ferita.

Integrare accuratamente il pozzetto con il terreno di coltura senza disturbare il cerotto della ferita.

Prendi un inserto membranoso contenente una coltura aderente di cellule della cresta neurale, o NCC - cellule secretorie - in un terreno adatto. Posizionare l'inserto all'interno del pozzetto, in modo che gli NCC alla base siano vicini al cerotto della ferita. Incubare la co-coltura per la durata desiderata.

Durante l'incubazione, gli NCC rilasciano molecole di segnalazione che si legano ai recettori specifici sui mioblasti, avviando una cascata di segnalazione. Questa segnalazione facilita la riorg