Dosaggio delle sostanze reattive all'acido tiobarbiturico per valutare lo stress ossidativo nel siero umano

Le cellule generano bassi livelli di radicali liberi durante i processi metabolici.

In condizioni patologiche, si verifica una sovrapproduzione di radicali liberi, causando stress ossidativo. Questi radicali liberi attaccano gli acidi grassi polinsaturi nei fosfolipidi della membrana cellulare in un processo chiamato perossidazione lipidica. Questo forma prodotti di ossidazione tossici, tra cui idroperossidi lipidici e malondialdeide (MDA), che causano danni alla membrana e morte cellulare.

Per rilevare lo stress ossidativo nel siero umano in vitro utilizzando il test della sostanza reattiva dell'acido tiobarbiturico (TBARS), iniziare con una provetta contenente siero umano trattato con un composto che induce l'ossidazione. Il siero trattato comprende principalmente prodotti di perossidazione lipidica - MDA e idroperossidi lipidici - insieme a fosfolipidi, lipidi e proteine.

Successivamente, aggiungi il dodecil solfato di sodio (SDS) e mescola per solubilizzare i lipidi e rilasciare l'MDA. La SDS denatura tutte le proteine contaminanti. Aggiungere un tampone acido adatto, seguito da acido tiobarbiturico acido (TBA). Incubare ad alta temperatura.

In condizioni acide e ad alte temper