Saggio di germinazione delle coroidi per studiare la proliferazione microvascolare oculare ex vivo

Nell'occhio dei mammiferi, la coroide, situata tra la sclera e la retina, contiene macrofagi perivascolari e coriocapillare, uno strato di capillari sanguigni rivestiti da periciti che fornisce ossigeno e sostanze nutritive alla retina. I vasi sanguigni anormali che spuntano dalla coriocapillare si verificano in diverse malattie oculari vascolari.

Per studiare la coriocapillare disregolata che germoglia ex vivo, prendere espianti di occhio di topo raccolti contenenti la coroide attaccata alla sclera e all'epitelio pigmentato retinico, o RPE.

Aggiungi goccioline di estratto di membrana basale, o BME, un idrogel arricchito in proteine della matrice extracellulare, ai pozzetti di una piastra a più pozzetti. Posizionare gli espianti nella gocciolina, evitando l'appiattimento dei tessuti. Lasciare che il BME si solidifichi.

Aggiungere terreno integrato con cellule endoteliali o fattori di crescita specifici per l'EC. Incubare. L'RPE secerne un fattore di crescita dell'endotelio vascolare che, insieme ai fattori di crescita specifici dell'EC, stimola la proliferazione dell'EC capillare.

Il BME solidificato forma una matrice extracellulare che promuove le EC proliferanti a formare tubuli