Biopanning basato su biosensori per microbilance a cristalli di quarzo per studiare le interazioni proteina-farmaco

Per studiare le interazioni proteina-farmaco, si inizia con una microbilancia a cristalli di quarzo, QCM, chip sensore costituito da materiale ceramico piezoelettrico rivestito da un sottile strato d'oro che funge da elettrodo.

Sovrapporre l'elettrodo con la soluzione del farmaco in esame, formando uno strato uniforme.

Inserire il chip del sensore nell'apparato QCM. Immergerlo in una cuvetta contenente tampone. Applicare un campo elettrico, facendo oscillare i cristalli ceramici a una frequenza fissa in base alla massa delle molecole del farmaco sul chip del sensore.

Aggiungere una libreria di fagi T7 contenente una miscela di fagi geneticamente modificati che mostrano varianti peptidiche fuse con la proteina del capside dei fagi. I fagi che mostrano un peptide specifico si legano alle molecole di farmaci con alta affinità e vengono immobilizzati sul chip del sensore. Questo panning dei fagi T7 aumenta la massa sul chip del sensore, con conseguente diminuzione dell'oscillazione del cristallo nel tempo.

Dopo l'equilibrio, trasferire il chip del sensore legato ai fagi in una capsula di Petri umida. Sovrapporre il chip con una soluzione batterica e incubare. I fagi infettano i batteri