Cromatografia ad esclusione dimensionale con diffusione della luce multi-angolo per oligomeri proteici

Un oligomero proteico è un complesso di più subunità proteiche che si legano insieme per formare un'unità funzionale più grande.

Per determinare il peso molecolare dei monomeri proteici e dei loro oligomeri in soluzione mediante SEC-MALS, una combinazione di cromatografia ad esclusione dimensionale e diffusione della luce multi-angolo, iniziare con una cromatografia ad esclusione dimensionale, o colonna SEC.

La colonna contiene perle di gel sferiche porose simili a setacci che intrappolano al loro interno molecole di dimensioni più piccole. Equilibrare la colonna con un tampone compatibile con lo stato nativo della proteina.

Caricare un campione contenente monomeri e oligomeri proteici nella parte superiore della colonna.

Durante il flusso, gli oligomeri passano attraverso lo spazio interparticellare della colonna, mentre i monomeri rimangono intrappolati all'interno dei pori delle perle. Ciò fa sì che gli oligomeri proteici di dimensioni maggiori viaggino più velocemente rispetto ai monomeri di dimensioni più piccole.

Dirigere gli oligomeri a eluizione rapida, seguiti dai monomeri a lenta eluizione, al rivelatore MALS.

Mentre passano attraverso il rilevatore, una luce laser li ill