JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Tecniche Biologiche
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Iniziare il test di microarray dell'antigene virale con un vetrino di microarray dell'antigene virale preparato.
Il vetrino contiene più pad, ciascuno con un singolo array contenente centinaia di antigeni purificati di più ceppi virali stampati su punti disposti in una griglia. Ogni punto contiene un singolo tipo di antigene adsorbito sulla superficie tridimensionale della nitrocellulosa microporosa.
Fissare il vetrino in una camera per facilitarne la manipolazione durante le fasi successive. Aggiungere un tampone bloccante contenente proteine che si legano alle superfici rimanenti del vetrino per prevenire il legame non specifico degli anticorpi alla superficie.
Incubare il vetrino per microarray con siero umano diluito. Gli isotipi anticorpali nel siero, specifici per gli antigeni presenti sul vetrino, riconoscono e si legano agli epitopi degli antigeni.
Rimuovere il siero. Lavare con un tampone per rimuovere gli anticorpi e le proteine non legati sul vetrino.
Aggiungere miscele di anticorpi secondari coniugati con punti quantici, ciascuna con un punto quantico diverso. Gli anticorpi secondari isotipo-specifici si legano in modo specifico al rispettivo isotipo di anticorpo sieric
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