Isolamento di monociti da sangue intero mediante selezione immunomagnetica negativa

Per isolare i monociti, un tipo di globuli bianchi, dal sangue intero mediante selezione immunomagnetica negativa, ottenere sangue umano trattato con anticoagulante in una provetta. Aggiungere una soluzione cocktail di anticorpi contenente anticorpi bloccanti il recettore Fc e complessi di anticorpi tetramerici bispecifici.

Ogni complesso anticorpale comprende due anticorpi monoclonali, di cui uno specifico per gli antigeni della superficie cellulare sulle cellule non monocitarie, compresi i globuli bianchi e rossi, e l'altro anticorpo specifico per il destrano.

Aggiungere una soluzione di microsfere magnetiche rivestite di destrano. Incubare. L'anticorpo che blocca il recettore Fc si lega al recettore Fc dei monociti, impedendo il legame non specifico degli anticorpi monoclonali.

Gli anticorpi monoclonali nei complessi anticorpali riconoscono e si legano a specifici antigeni della superficie cellulare sulle cellule non monocitarie, lasciando i monociti non marcati. Le microsfere magnetiche rivestite di destrano si legano all'anticorpo anti-destrano dei complessi anticorpali, reticolando le cellule non monocitarie alle perline.

Posizionare il tubo in un supporto magnetico. Sotto l'