Coltura in vitro e differenziazione dei monociti primari in macrofagi

I monociti sono cellule immunitarie che si differenziano in macrofagi e cellule dendritiche presentanti l'antigene per proteggersi dalle infezioni.

Per coltivare i monociti e indurne la differenziazione in vitro, iniziare prelevando una sospensione di monociti umani primari in un terreno di coltura adatto. Aggiungere la sospensione cellulare nei pozzetti di una piastra di coltura. Incubare in condizioni fisiologiche per consentire alle cellule di aderire.

Aggiungi le citochine che inducono la differenziazione – fattore stimolante le colonie di granulociti-macrofagi, o GM-CSF, a un pozzetto e il fattore stimolante le colonie di macrofagi, o M-CSF, a un altro. Incubare per una durata adeguata.

GM-CSF si lega al suo recettore eterodimerico sulle cellule e induce la differenziazione dei monociti. Il legame GM-CSF provoca l'attivazione di vie di segnalazione intracellulare, portando all'espressione di geni per il priming in un fenotipo simile ai macrofagi M1.

Le cellule M1-like – cellule arrotondate con un grande volume citoplasmatico – sono pro-infiammatorie e aiutano nella difesa contro le infezioni.

Nell'altro pozzetto, l'M-CSF si lega al suo recettore omodimerico sui monociti e indu