JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 4:56 min. • July 8th, 2025
Le cellule somatiche adulte possono essere riprogrammate geneticamente per ottenere cellule staminali pluripotenti indotte, iPSC, che mostrano stati indifferenziati e proliferativi simili alle cellule staminali.
Per differenziare le iPSC umane in macrofagi – globuli bianchi che fagocitano agenti patogeni e detriti cellulari – iniziare con una piastra di coltura con una superficie adesiva non cellulare.
Aggiungere terreni contenenti i fattori di crescita, la proteina morfogenetica ossea, il fattore delle cellule staminali e il fattore di crescita dell'endotelio vascolare. Semina le iPSC e incuba.
La superficie non adesiva impedisce l'adesione delle iPSC e mantiene le cellule in sospensione, facilitando l'aggregazione in corpi embrioidi tridimensionali, EB. I fattori di crescita avviano la differenziazione delle iPSC all'interno degli EB in cellule di linea mesodermica.
Trasferire gli EB differenziati in una provetta da centrifuga. Lasciali stabilizzare attraverso la gravità. Risospendere gli EB in terreni freschi contenenti interleuchina-3, IL3 e fattore stimolante le colonie di macrofagi, CSF1. Piastra gli EB su una piastra di coltura cellulare rivestita di gelatina.
La gelatina, u
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