Isolamento dei linfociti da un cerotto di Peyer di topo

I cerotti di Peyer, PP, aggregati di tessuti linfoidi organizzati nella parete dell'intestino tenue, contengono cellule immunitarie tra cui linfociti B, linfociti T, cellule dendritiche e macrofagi.

Per isolare i linfociti dai PP di topo, iniziare con un topo soppresso. Incidere la parete addominale, esponendo la cavità peritoneale. Individua il cieco. Sezionare la giunzione ileocecale per separare il cieco dall'intestino tenue.

Asportare il mesentere e incidere l'intestino tenue in corrispondenza del duodeno per rimuovere l'intestino tenue dalla cavità peritoneale. Mettere l'intestino tenue in un piatto a più pozzetti contenente terreno refrigerato e risciacquare per rimuovere i detriti.

Posizionare l'intestino tenue con il lato mesenterico rivolto verso il basso e inumidire con un mezzo per mantenere l'idratazione dei tessuti. Identificare i PP, aggregati bianchi multilobulati sul lato anti-mesenterico della parete intestinale.

Asportare con cura i PP, escludendo il tessuto intestinale circostante. Trasferire in un tubo contenente il mezzo. Incubare sotto costante agitazione. Questa fase di agitazione stacca il muco, i detriti cellulari e qualsiasi materia fecale dai PP, migliora