Generazione di cellule dendritiche immature, mature e tollerogeniche da monociti

Per suscitare una risposta immunitaria, le cellule dendritiche, DC, presentano un antigene mostrato con MHC di classe II e le molecole co-stimolatorie CD80 e CD86. In base alle caratteristiche della risposta immunitaria, si suddividono in DC immature, mature e tollerogene.

Per generare vari sottogruppi di cellule dendritiche in vitro, iniziare con una piastra multi-pozzetto contenente monociti umani - cellule precursori immunitarie in un mezzo completo contenente fattori di crescita e la citochina IL-4 - una molecola di segnalazione.

Incubare le cellule per un periodo prolungato. I fattori di crescita e l'IL-4 inducono la proliferazione e la differenziazione dei monociti in DC immature.

Le DC immature possiedono recettori per il riconoscimento dei pattern, PRR, ed esprimono molecole MHC basse di classe II e co-stimolatorie, esibendo una ridotta capacità di suscitare una risposta immunitaria.

Trattare un pozzetto contenente DC immature con agenti immunomodulatori: vitamina D3 e glucocorticoidi. Questi agenti immunomodulatori sottoregolano l'espressione delle molecole MHC di classe II e co-stimolatorie. Ciò porta alla differenziazione in DC tollerogeniche, cellule immunoregolatorie c