JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 4:00 min. • July 8th, 2025
Le cellule stromali del midollo osseo, BMSC, progenitori delle linee del tessuto scheletrico, risiedono all'interno della cavità del midollo osseo insieme a una popolazione cellulare eterogenea che comprende cellule staminali ematopoietiche, HSC e cellule del sangue differenziate.
Per isolare le BMSC, inizia con una tibia di topo appena raccolta. Tagliare le estremità prossimale e distale dell'osso per esporre la cavità del midollo osseo. Posizionare l'osso tagliato in un tubo di microfuga adatto contenente terreno.
Centrifugare ad alta velocità per eliminare il midollo osseo dall'osso e formare un pellet di midollo osseo sul fondo della provetta. Rimuovere l'osso dal tubo. Usando un ago attaccato a una siringa, triturare il midollo osseo per rompere i grumi.
Aggiungere del medio alla sospensione. Filtrare attraverso un colino cellulare di dimensioni adeguate per rimuovere i frammenti ossei. Placcare il filtrato contenente cellule del midollo osseo in una piastra di coltura di plastica.
Durante l'incubazione per la durata appropriata, le BMSC aderiscono al fondo della piastra di coltura in plastica e proliferano, mentre le cellule non aderenti, comprese le HSC, rimangono in sospens
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