Coltura di cellule T attivate da cellule mononucleate del sangue periferico umano

Le molteplici interazioni recettore-ligando della superficie cellulare tra le cellule T naive e le cellule presentanti l'antigene, le APC, suscitano l'attivazione e la proliferazione delle cellule T.

I due eventi primari in questo processo coinvolgono il riconoscimento dell'antigene espresso da APC da parte del complesso recettoriale delle cellule T CD3, seguito dall'interazione tra il ligando B7 espresso da APC e il recettore delle cellule T CD28.

Per studiare l'attivazione e la proliferazione delle cellule T in vitro, prelevare cellule mononucleate del sangue periferico umano, PBMC, sospese in un terreno di coltura adatto. Aggiungere perle magnetiche rivestite con anticorpi anti-CD3 e anti-CD28 e dividere le cellule in due tubi conici.

Aggiungere la citochina interleuchina-2, IL-2, alla prima provetta e l'interleuchina-15, IL-15, all'altra. Trasferire le cellule in una piastra a più pozzetti. Incubare.

Gli anticorpi anti-CD3 e anti-CD28 delle perle si legano rispettivamente al complesso del recettore delle cellule T CD3 e al recettore CD28 espressi sulle cellule T, causando l'attivazione e la proliferazione delle cellule T.

Con IL-2, la citochina si lega al suo recettore sulla su