Un metodo in vitro per la differenziazione dei megacariociti e la formazione delle piastrine

I megacariociti sono grandi cellule multinucleate che danno origine alle piastrine, essenziali per la coagulazione del sangue.

Per produrre piastrine in vitro, prelevare una coltura in sospensione di cellule staminali e progenitrici ematopoietiche, HSPC, derivate dal sangue del cordone ombelicale umano.

Aggiungere trombopoietina e incubare in condizioni fisiologiche. La trombopoietina si lega al suo recettore sulle HSPC, innescando eventi di segnalazione che portano alla differenziazione delle HSPC in megacariociti immaturi.

Le cellule immature subiscono un processo di maturazione per formare megacariociti maturi. Le cellule mature sono grandi e contengono granuli secretori citoplasmatici. Possiedono un nucleo poliploide multilobato e un sistema di membrane invaginate nel citoplasma.

I megacariociti maturi producono estensioni citoplasmatiche lunghe e sottili: le propiastrine. Le propiastrine, rigonfiamenti multipli delle dimensioni di una piastrina collegati da sottili ponti citoplasmatici, vengono rilasciati nel terreno.

I ponti citoplasmatici si rompono, provocando il rilascio di singole piastrine. Centrifugare per ottenere le piastrine sotto forma di pellet. Scartare il surnata