JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 5:06 min. • July 8th, 2025
Per generare emigranti timici derivati da iPSC, iTE da cellule T immature in un sistema di coltura di organi timici 3D, assumere deossiguanosina, lobi timici fetali di topo trattati con dGUO in terreni adatti.
La dGUO entra nell'ambiente timico e distrugge i linfociti timici endogeni, prevenendo la loro interferenza con le cellule T immature derivate da iPSC durante la co-coltura.
Fai un'incisione profonda al centro di ogni lobo timico. Trasferire i lobi in una piastra di coltura fresca contenente terreno integrato con i fattori di crescita, il fattore delle cellule staminali, il ligando FLT3 e l'interleuchina-7.
Pipettare il terreno contenente il lobo del timo nei pozzetti di una piastra di coltura 3D. Aggiungere cellule T immature derivate da iPSC. Incubare. Le cellule T migrano nei lobi timici attraverso l'incisione.
All'interno dell'ambiente timico, i fattori di crescita FLT3 ligando e IL-7 si legano ai rispettivi recettori sulle cellule T immature portando all'attivazione di fattori di trascrizione e all'espressione di geni specifici.
Di conseguenza, le cellule T immature subiscono una serie di cambiamenti e acquisiscono caratteristiche specifiche, maturando infine in cellule
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