JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 4:17 min. • July 8th, 2025
Per isolare le cellule natural killer, o cellule NK, globuli bianchi specializzati coinvolti nell'immunità innata, si inizia con il tessuto epatico umano contenente diverse popolazioni cellulari, tra cui cellule contenenti grasso, eritrociti, granulociti, linfociti e altre cellule associate intrappolate all'interno di una matrice extracellulare ricca di collagene o ECM.
Tritare il tessuto in piccoli pezzi e trasferirli in una provetta contenente collagenasi, un enzima proteolitico. La collagenasi scinde il collagene, interrompe la matrice e allenta le cellule legate alla ECM.
Inserire il tubo in un dissociatore tissutale. Questa dissociazione meccanica disintegra ulteriormente l'ECM per rilasciare le cellule attaccate in modo lasco nella soluzione. Filtra il contenuto per rimuovere il tessuto non digerito e i frammenti della ECM e raccogli il filtrato contenente varie cellule.
Risospendere le cellule in un tampone contenente polivinilpirrolidone o perle di silice rivestite di PVP. Le perle PVP si legano selettivamente con le cellule contenenti grasso, separandole efficacemente dal resto delle cellule.
Centrifugare a bassa velocità per pellettare la popolazione cellulare; scartare i
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