JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 3:58 min. • July 8th, 2025
Dopo la lesione vascolare, le piastrine vengono reclutate e attivate nel sito della lesione per formare un tappo piastrinico e avviare la riparazione dei tessuti.
Per purificare le piastrine dal sangue intero murino e attivarle in vitro, assumere un mezzo di gradiente di densità adatto. Sovrapporre con cura il campione di sangue sopra il terreno. Centrifugare per separare le piastrine dal plasma e gli strati dei globuli rossi e bianchi.
Trasferire le piastrine in due nuove provette contenenti un tampone di colorazione adatto. Aggiungere il tetrapeptide sintetico GPRP contenente la sequenza di aminoacidi glicina-prolina-arginina-prolina in una provetta, seguita da trombina.
La trombina scinde specifici domini extracellulari dei recettori della trombina sulla superficie piastrinica, avviando una cascata di segnalazione a valle e attivando le piastrine. I granuli delle piastrine attivate rilasciano la proteina CD62P, che trasloca rapidamente sulla superficie della membrana.
Il tetrapeptide GPRP blocca il fibrinogeno, una glicoproteina che si lega all'integrina CD41/CD61 che attraversa la membrana sulle piastrine attivate per avviare l'aggregazione piastrinica, mantenendo così le piast
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