JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 4:02 min. • July 8th, 2025
Le trappole extracellulari dei neutrofili, o NET, sono strutture simili a ragnatele di fibre di cromatina complessate con proteine antimicrobiche che intrappolano e neutralizzano gli agenti patogeni. I NET sono secreti dai neutrofili, cellule immunitarie che immagazzinano proteine antimicrobiche in granuli citoplasmatici specializzati.
Per studiare la formazione di NET in vitro, assumere una sospensione di neutrofili isolati. Aggiungi l'acetato di mirito, o PMA, un composto pro-infiammatorio lipofilo. Placcare le cellule e incubarle.
La PMA attraversa la membrana dei neutrofili ed entra nel citoplasma, dove si lega e attiva la proteina chinasi C o PKC.
La PKC attivata induce a valle la segnalazione per fosforilare i componenti citoplasmatici della NADPH ossidasi, un complesso enzimatico, causandone l'assemblaggio sulla membrana plasmatica e granulare. Il complesso produce specie reattive dell'ossigeno o ROS.
I ROS causano il rilascio di proteasi e proteine antimicrobiche dai granuli. Le proteasi granulari, insieme agli enzimi di citrullinazione attivati da ROS, traslocano nel nucleo.
Le proteasi granulari causano una parziale degradazione degli istoni, mentre gli enzimi di citrulli
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