JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 3:19 min. • July 8th, 2025
La gengiva, o tessuto gengivale, circonda la porzione cervicale dei denti e l'osso mascellare.
Il tessuto gengivale comprende uno strato di epitelio, separato dal tessuto connettivo sottostante da una membrana basale ricca di collagene IV. Il tessuto connettivo gengivale contiene una rete di cellule immunitarie, tra cui linfociti, mastociti e neutrofili che proteggono la gengiva dalle infezioni.
Per isolare la rete di cellule immunitarie gengivali, prelevare blocchi di denti murini contenenti tessuto gengivale saldamente attaccato. Trattare i blocchi con un cocktail enzimatico, contenente collagenasi di tipo quattro e DNasi.
Le collagenasi entrano nel tessuto, degradano il collagene-IV e interrompono la membrana basale e l'epitelio gengivale, causando l'allentamento della gengiva dai denti. Nel frattempo, le DNasi degradano i contaminanti del DNA. Aggiungere un agente chelante al tubo; per rimuovere i cationi bivalenti e prevenire l'aggregazione cellulare.
Trasferire i blocchi di denti digeriti in una capsula di Petri contenente terreno DNasi. Estrarre il tessuto gengivale dai blocchi dentali e trasferirlo in un colino cellulare.
Usando uno stantuffo, schiaccia il fazzoletto. Quest
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