JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 5:41 min. • July 8th, 2025
Macerare la milza e i linfonodi di topo su un colino cellulare. Sciacquare il colino con un tampone adatto per raccogliere splenociti e linfociti.
Incubare le cellule con un cocktail di anticorpi biotinilati e microsfere magnetiche anti-biotina che si legano alle cellule non CD8+.
Far passare la sospensione cellulare attraverso una colonna magnetica. A causa della forza magnetica, le cellule non-CD8+ legate a perline si legano alla parete della colonna mentre le cellule T CD8+ eluscono.
Incubare le cellule eluite con cellule artificiali presentanti l'antigene, aAPC. Si tratta di nanoparticelle magnetiche funzionalizzate con la proteina di fusione del complesso maggiore di istocompatibilità-immunoglobulina caricata con antigene, MHC-Ig e anticorpo anti-CD28.
Le MHC-Ig caricate con l'antigene si legano a recettori distinti sulle cellule T CD8+ antigene-specifiche. Gli anticorpi anti-CD28 interagiscono con i recettori CD28 delle cellule T, avviando l'attivazione delle cellule T.
Posizionare il tubo contenente nanoparticelle magnetiche e miscela di cellule su un supporto magnetico. Le cellule T CD8+ legate ad aAPC vengono attratte dal campo magnetico, mentre le cellule T CD8+ non speci
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