Marcatura dei linfociti T helper murini utilizzando anticorpi monoclonali radiomarcati

Per radiomarcare il T helper murino, i linfociti Th portatori di un recettore delle cellule T, TCR, specifico per il peptide dell'ovoalbumina di pollo, prelevano una provetta contenente anticorpi monoclonali radiomarcati, mAbs, con l'attività radioattiva desiderata.

L'anticorpo monoclonale è costituito da un anticorpo monoclonale murino specifico per il TCR espresso sulla membrana del linfocita Th murino. Un chelante coniuga l'anticorpo monoclonale e un isotopo di rame che emette positroni, formando un complesso stabile.

Diluire gli anticorpi monoclonali radiomarcati con soluzione fisiologica. Successivamente, aggiungere gli anticorpi monoclonali radiomarcati diluiti a una piastra multipozzetto contenente una sospensione di linfociti Th. Incubare brevemente.

All'interno della coltura, gli anticorpi monoclonali radiomarcati si legano ai TCR sulle membrane dei linfociti Th. Dopo l'incubazione, trasferire la sospensione cellulare in una provetta nuova.

centrifuga. Eliminare il surnatante contenente anticorpi radiomarcati non legati. Risospendere i linfociti Th in terreno e trasferirli in una piastra a più pozzetti. Incubare per un periodo prolungato.

Il legame radiomarcato mAb-TCR pro