Microscopia intravitale per analizzare le interazioni tra cellule del sangue ed endoteliali in un modello murino di infiammazione

Inizia con un topo anestetizzato a cui è stato iniettato per via intraperitoneale un lipopolisaccaride per indurre l'infiammazione.

Incidere l'addome per esporre la cavità addominale. Mantenere l'idratazione degli organi con soluzione fisiologica. Iniettare rodamina 6G per via retroorbitale. Le molecole di colorante fluorescente entrano in circolo ed etichettano leucociti e piastrine per la loro visualizzazione.

Ora, esteriorizza un anello di ileo con i suoi vasi mesenterari. Mantieni il tessuto idratato con soluzione fisiologica preriscaldata per un imaging ottimale. Sotto un microscopio a fluorescenza, mettere a fuoco una vena mesentere per la microscopia intravitale.

L'iniezione di lipopolisaccaridi provoca l'attivazione delle cellule endoteliali con l'upregolazione delle molecole di adesione, comprese le selectine. Le piastrine circolanti vengono reclutate nell'endotelio, dove si legano attraverso specifiche interazioni molecola di adesione-ligando, formando complessi di adesione.

A causa di queste interazioni, le piastrine si attivano e rilasciano granuli contenenti molecole, tra cui la serotonina, promuovendo il reclutamento dei leucociti.

I leucociti si spostano sulla superf