Una tecnica per stabilire un modello di infezione batterica nelle larve di insetti

Posizionare una larva di Galleria mellonella - la falena della cera maggiore - su una piattaforma di iniezione, esponendo il lato ventrale.

Prendi una microsiringa contenente una sospensione di Mycobacterium bovis BCG lux, un ceppo di vaccino batterico vivo geneticamente modificato per produrre bioluminescenza. Iniettare la sospensione nell'ultima gamba o nelle appendici addominali, rilasciando batteri nell'emolinfa, nel liquido circolatorio nella cavità del corpo.

Trasferire la larva in un ambiente controllato e incubarla. I batteri utilizzano l'emolinfa come ricca fonte di sostanze nutritive e si moltiplicano.

Gli emociti, le cellule immunitarie invertebrate nell'emolinfa, si raggruppano attorno ai batteri, formando una struttura simile a un granuloma per prevenire la diffusione dell'infezione. Gli emociti rilasciano pro-fenoliossidasi, che subisce una scissione proteolitica per formare fenolidossidasi.

La

fenolidasi sintetizza la melanina, che sequestra i batteri nel sito di infezione. La deposizione di pigmento di melanina provoca melanizzazione sistemica, scurimento del colore larvale.

Gli emociti inghiottono i batteri nei fagosomi. I fagosomi si fondono con i lisosomi per acq