Imaging in tempo reale della fagocitosi macrofagica dei globuli rossi opsonizzati IgG

Prendi una diapositiva del canale contenente macrofagi di topo. Il canale si collega a serbatoi pieni di substrati, fornendo nutrienti ai macrofagi.

Sostituire i terreni con anticorpi marcati in fluorescenza contenenti terreni che si legano a specifiche glicoproteine di superficie, marcando i macrofagi.

Prendiamo i globuli rossi umani, i globuli rossi, con membrane cellulari marcate in fluorescenza. Opsonizzare i globuli rossi con anticorpi IgG di topo, che si legano specificamente alla glicoforina A.

Aggiungere i globuli rossi opsonizzati con IgG al vetrino contenente macrofagi. I recettori Fc dei macrofagi legano la regione Fc delle IgG sui globuli rossi, determinando il raggruppamento dei recettori Fc attorno all'area di contatto e marcando i globuli rossi per la fagocitosi.

Il legame innesca le vie di segnalazione intracellulare e attiva le GTPasi. Le GTPasi attivate guidano la riorganizzazione e la polimerizzazione dell'actina, formando sottili sporgenze di membrana chiamate filopodi.

Inoltre, i filopodi si estendono intorno ai globuli rossi, racchiudendoli all'interno della coppa fagocitaria in via di sviluppo. I bordi della coppa si fondono, formando un fagosoma che internal