Stimolazione e visualizzazione in vitro di trappole extracellulari per macrofagi
JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 4:31 min. • July 8th, 2025
Inizia con una coltura di macrofagi aderente.
Aggiungere citochine pro-infiammatorie.
La citochina si lega ai recettori di superficie dei macrofagi, avviando una serie di eventi infiammatori.
In primo luogo, la segnalazione delle citochine innesca la produzione di peptidi antimicrobici.
Contemporaneamente, la cromatina all'interno del nucleo macrofagico subisce la decondensazione.
Questo processo, insieme ai cambiamenti nella composizione della membrana, distrugge la membrana nucleare, rilasciando cromatina decondensata nel citoplasma.
Nel citoplasma, il peptide antimicrobico interagisce con la cromatina rilasciata.
La permeabilizzazione della membrana cellulare mediata dalla segnalazione delle citochine provoca il rilascio della cromatina decondensata nello spazio extracellulare, formando una trappola extracellulare per macrofagi, o MET.
Queste strutture simili a ragnatele sono costituite da DNA, istoni, molecole antimicrobiche ed enzimi.
Aggiungere SYTOX green, un colorante fluorescente a base di acido nucleico che si lega selettivamente al DNA esposto nelle trappole extracellulari.
Al microscopio a fluorescenza, il MET appare come strisce verdi di DNA extracellulare rilasciate d
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