Imaging a fluorescenza enzimatica Reporter per il monitoraggio in vivo dell'infezione batterica

0 visualizzazioni • 5:26 min. • July 8th, 2025

Esporre un topo a goccioline di aerosol contenenti Mycobacterium tuberculosis.

I batteri raggiungono il lume degli alveoli, le minuscole sacche d'aria all'interno dei polmoni, che contengono macrofagi.

I recettori di riconoscimento dei modelli di macrofagi si legano ai modelli molecolari associati ai patogeni sui batteri, innescando il loro inghiottimento in un fagosoma.

I batteri inghiottiti secernono proteine specializzate, che rompono la membrana del fagosoma. I batteri fuoriescono nel citoplasma e si riproducono.

Dopo l'infezione, anestetizzare il topo. Somministrare intraperitonealmente un substrato reporter dell'enzima batterico β-lattamasi per la fluorescenza dell'enzima reporter o l'imaging REF.

Il substrato raggiunge gli alveoli polmonari attraverso la circolazione ed entra nelle cellule infette.

Penetra nella membrana esterna batterica per raggiungere lo spazio periplasmatico contenente β-lattamasi.

Il substrato contiene un anello β-lattamico che collega un fluorocromo e un quencher. A causa della prossimità, la fluorescenza del fluorocromo viene assorbita dal quencher.

La β-lattamasi idrolizza l'anello β-lattamico, rilasciando il fluoroforo e provocando l'emissione di fl

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