Un test di infezione batterica per lo studio delle interazioni batteri-cellule ospiti anaerobiche

Inizia con una coltura di cellule endoteliali.

Sostituire il supporto con un supporto anaerobico. Incubare in una camera anaerobica per l'equilibrio della temperatura.

Aggiungere il Porphyromonas gingivalis, un batterio anaerobio patogeno, e incubare brevemente.

I batteri possiedono proiezioni proteiche, note come fimbrie, che si legano a specifiche molecole di adesione sulle cellule endoteliali, facilitando l'adesione batterica.

Questo legame innesca cascate di segnalazione intracellulare, con conseguente riarrangiamento del citoscheletro di actina e internalizzazione batterica nei fagosomi.

Dopo l'incubazione, rimuovere il terreno. Lavare con un tampone anaerobico per rimuovere i batteri extracellulari non aderiti.

Aggiungere un detergente delicato per permeabilizzare le membrane cellulari dell'ospite e indurre la lisi cellulare, rilasciando batteri internalizzati e attaccati alla superficie senza causare danni.

Diluire i batteri contenenti lisato con terreni e preparare diluizioni seriali.

Piastra queste diluizioni su piastre di agar sanguigno. Incubare in condizioni anaerobiche per consentire a Porphyromonas gingivalis di proliferare e formare colonie.

Dopo l'incubazione, conta