JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 4:02 min. • July 8th, 2025
Inizia con un piatto contenente larve di pesce zebra transgenico anestetizzate e incorporate nell'agarosio che esprimono la proteina fluorescente fotoconvertibile nei loro leucociti, le cellule immunitarie fagocitiche.
La vescicola otica sinistra, pre-iniettata con batteri marcati con colorante fluorescente rosso, è posizionata in piano contro il fondo della piastra.
All'interno della vescicola otica, i batteri pre-iniettati causano un'infezione locale, innescando la migrazione delle cellule immunitarie e il rilascio di chemochine, causando l'infiltrazione di leucociti nella vescicola otica.
Al microscopio a fluorescenza, osservare il reclutamento iniziale dei leucociti verdi e la fagocitosi dei batteri rossi da parte dei leucociti nel sito di infezione.
Illumina la vescicola otica con una lunghezza d'onda di 405 nanometri, trasformando irreversibilmente la proteina fluorescente fotoconvertibile da verde a rossa e impartendo fluorescenza rossa ai leucociti, consentendo la loro visualizzazione distinta e il tracciamento preciso.
Ora, esamina le larve a due diverse lunghezze d'onda a varie profondità, consentendo la visualizzazione sia dei leucociti a fluorescenza rossi fotoconvertit
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