JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 3:34 min. • July 8th, 2025
Prendi un coprioggetto a camera contenente mastociti, cellule immunitarie con granuli secretori, o SG, contenenti mediatori infiammatori.
Aggiungere gli anticorpi IgE insieme a un reporter fluorescente sensibile al pH e incubare.
Gli anticorpi si legano ai recettori Fc sui mastociti. I reporter vengono internalizzati tramite pinocitosi e gli endosomi risultanti si fondono con i SG.
Rimuovere il supporto. Aggiungere un antigene contenente più epitopi leganti le IgE; Posizionare il vetrino sotto un microscopio a fluorescenza e applicare la lunghezza d'onda di eccitazione richiesta.
Il pH acido degli SG spegne la fluorescenza del reporter.
L'antigene si lega ai complessi del recettore IgE sulla superficie cellulare, reticolandoli.
L'aggregazione del recettore mediata dall'antigene innesca la migrazione degli SG verso la membrana plasmatica.
Le proteine SNARE sul plasma e sulla membrana SG mediano la fusione della membrana e lo scarico del carico SG, chiamata esocitosi.
L'aumento del pH del mezzo provoca l'alcalinizzazione dell'SG, inducendo i reporter a riacquistare la fluorescenza.
Gli SG in entrata si fondono con quelli fusi a membrana. L'alcalinizzazione del secondo SG media il rec
Visualizza la trascrizione completa e accedi a migliaia di video scientifici