JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 2:49 min. • July 8th, 2025
Prendi un dispositivo di filtraggio centrifugo di grande volume contenente membrane verticali di cellulosa rigenerata di una dimensione dei pori adeguata.
Aggiungere il tampone e centrifugare. Rimuovere l'umettante di membrana che contiene il flusso.
Caricare il dispositivo con la proteina filtrata di coltura batterica, o CFP, che comprende proteine solubili e vescicole extracellulari, o EV, strutture legate ai lipidi di dimensioni nanometriche contenenti biomolecole secrete dai batteri.
Durante la centrifugazione, il CFP passa tangenzialmente attraverso le membrane tramite la forza centrifuga.
Le biomolecole più piccole dei pori della membrana passano attraverso il fluido di coltura, mentre quelle più grandi, come le vescicole extracellulari, passano sopra la superficie della membrana, riducendo al minimo l'intasamento della membrana.
Il filtro concentra la CFP in un volume minimo del dispositivo, aiutato dal suo volume dead-stop per prevenire l'essiccazione delle biomolecole.
Aggiungere il tampone e centrifugare.
Il tampone sostituisce i componenti residui del terreno, creando un ambiente isotonico per le biomolecole CFP e mantenendone l'integrità.
Posizionare la tazza del concen
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