JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 6:34 min. • July 8th, 2025
Prendi una sospensione di Bacillus anthracis ucciso chimicamente e marcato in modo fluorescente.
La capsula batterica, composta principalmente da acido poligamma-glutammico, fornisce protezione contro la fagocitosi.
Prendiamo i sieri di primati non umani, inattivati termicamente per distruggere le proteine del complemento. Questi sieri, isolati da animali immunizzati con un vaccino a base di capsule batteriche, contengono anticorpi anti-capsula.
Aggiungere la sospensione batterica chimicamente uccisa al siero. Gli anticorpi si legano specificamente alle capsule batteriche, facilitando l'opsonizzazione batterica e marcandole per l'eliminazione da parte delle cellule fagocitiche. Aggiungere proteine standard del complemento per migliorare l'opsonizzazione.
Trasferire i batteri opsonizzati ai macrofagi aderenti - cellule fagocitarie. Incubare brevemente.
Gli anticorpi e le proteine del complemento sui batteri si legano rispettivamente ai recettori Fc dei macrofagi e ai recettori del complemento, promuovendo l'aderenza batterica.
Rimuovi i supporti. Lavare con tampone per rimuovere i batteri non aderenti.
Fissare le cellule per preservare l'integrità cellulare.
Usa un colorante fluores
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