JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 2:55 min. • July 8th, 2025
Scongelare le carte da filtro contenenti il liquido di rivestimento della mucosa nasale assorbito sul ghiaccio per evitare la degradazione del campione.
Il fluido comprende mediatori immunitari, tra cui chemochine e citochine.
Immergere le carte da filtro in un tampone. Trasferire il contenuto nei filtri tubolari. Centrifugare per eluire il fluido di rivestimento della mucosa dalla carta da filtro.
Aggiungere l'estratto nasale filtrato alla piastra del saggio modellata con una serie di anticorpi di cattura specifici per il mediatore.
I mediatori immunitari si legano agli anticorpi corrispondenti.
Introdurre anticorpi di rilevamento marcati con un complesso di rutenio, che si legano ai rispettivi mediatori.
Aggiungere un tampone a base di tris contenente tripropilammina o TPA.
Quando un potenziale viene applicato attraverso gli elettrodi, il complesso rutenio e il TPA subiscono ossidazione.
Il radicale TPA risultante eccita il complesso del rutenio.
Al ritorno al suo stato fondamentale, il complesso del rutenio emette fotoni.
L'intensità della luce misurata è proporzionale alla concentrazione specifica di mediatore immunitario nel fluido di rivestimento della mucosa.
Per la quantifi
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