JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 2:58 min. • July 8th, 2025
Procuratevi dei dischi fogliari di Arabidopsis thaliana. Immergerli in pozzetti per micropiastre contenenti acqua distillata doppia per evitare l'essiccazione.
Incubare i dischi per consentire il recupero dalla ferita.
Dopo l'incubazione, rimuovere l'acqua. Aggiungere una miscela di reazione contenente peptidi derivati da batteri, enzima perossidasi di rafano e luminol.
Utilizzando un lettore di micropiastre, misurare la luminescenza nel tempo.
I recettori di riconoscimento dei modelli, o PRR, sulle cellule vegetali, legano i peptidi batterici, che sono modelli molecolari associati ai microbi.
Inoltre, il PRR si associa al suo co-recettore, subendo fosforilazione reciproca, attivando protein chinasi simili a recettori e causando afflusso intracellulare di calcio.
Questo, a sua volta, attiva l'omologo della burst ossidasi respiratoria transmembrana, o proteine RBOH.
L'attivazione dell'RBOH catalizza la produzione di specie reattive extracellulari dell'ossigeno, o ROS, causando un burst ossidativo. Inoltre, i ROS vengono convertiti in perossido di idrogeno.
La perossidasi di rafano utilizza il perossido di idrogeno per ossidare il luminol in uno stato eccitato, emettendo luminescenza
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