Gli effetti dello stress da taglio sulle piastrine trattate con anticorpi contro i recettori meccanosensoriali

Iniziare con una piastra a più pozzetti contenente plasma ricco di piastrine. Le piastrine esprimono complessi meccanorecettoriali di superficie, che rispondono agli stimoli meccanici.

Il complesso meccanocettore contiene il dominio di legame del ligando extracellulare e la regione macro-glicopeptidica legata al dominio meccanosensoriale.

Introdurre anticorpi anti-meccanorecettori, reticolando con i domini leganti i ligandi dei recettori su piastrine opposte.

Posizionare una goccia della sospensione di plasma trattata con anticorpi tra i gruppi del viscosimetro.

Applicare lo sforzo di taglio, simulando la forza meccanica, allontanando i recettori legati agli anticorpi dalle piastrine, portando alla dissociazione della regione macro-glicopeptidica dal dominio meccanosensoriale.

Ciò innesca un cambiamento conformazionale nel dominio meccanosensoriale, attivando le piastrine e determinando l'espressione di marcatori di superficie.

Trasferire la sospensione piastrinica tranciata in un nuovo pozzetto all'interno della piastra a più pozzetti.

Introdurre un cocktail di molecole marcatrici specifiche marcate con fluorofori che interagiscono con i corrispondenti marcatori di superficie pias