Valutazione del potenziale antimicrobico degli isolati batterici fecali murini produttori di batteriocina
JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 2:49 min. • July 8th, 2025
Prendere una sospensione fecale di topo composta da batteri lattici, o LAB, che producono batteriocina, un peptide antimicrobico, e inoculare in un terreno di agar morbido selettivo LAB preriscaldato.
Versare il terreno in una piastra di agar, formando il primo strato.
Sovrapporre un secondo strato di agar e incubare.
Il primo strato promuove selettivamente la crescita del LAB, consentendo alle molecole di batteriocina secrete di diffondersi verso l'esterno dalle colonie nel mezzo circostante.
Il secondo strato contiene un terreno privo di cellule che consente la diffusione della batteriocina e impedisce la crescita di colonie di LAB sulla superficie.
Ora, versare un terzo strato di agar contenente un ceppo sensibile alla batteriocina.
I batteri che crescono nel terzo strato incontrano la batteriocina che si diffonde dagli strati inferiori.
La batteriocina distrugge la membrana cellulare dei batteri sensibili, disturbando l'omeostasi cellulare e provocando la morte cellulare, visibile come una zona chiara sul terzo strato.
Misurare il diametro della zona per valutare la potenza della batteriocina.
Per contare le cellule batteriche produttrici di batteriocina nei campioni fecali, tr
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