JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 5:10 min. • July 8th, 2025
Trattare sia la piomelanina che i ceppi batterici non produttori di piomelanina con un agente di prova.
La piomelanina, un pigmento extracellulare, fornisce protezione contro lo stress ossidativo.
L'agente in esame interrompe la biosintesi della piomelanina, riducendone la produzione.
Dopo l'incubazione, eseguire diluizioni batteriche seriali con un tampone contenente l'agente di prova o il solvente del veicolo.
Individuare le diluizioni batteriche su piastre di agar con concentrazioni variabili di perossido di idrogeno, un fattore di stress ossidativo.
Le piastre prive di perossido di idrogeno fungono da controlli.
incubare. Nelle piastre di controllo, i batteri formano colonie.
Nel ceppo produttore di piomelanina non trattato, la piomelanina protegge i batteri dal danno ossidativo indotto dal perossido di idrogeno, con conseguente formazione di colonie pigmentate.
Tuttavia, il ceppo produttore di piomelanina trattato con l'agente in esame, che presenta una riduzione della piomelanina, diventa sensibile allo stress ossidativo, con conseguente morte batterica.
Conta le colonie.
La riduzione del numero e delle dimensioni delle colonie con l'aumento delle concentrazioni di perossido
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