JoVE Enciclopedia degli esperimenti
Immunologia
0 visualizzazioni • 2:48 min. • July 8th, 2025
Inizia con un campione contenente virus ottenuto da una cornea suina infetta trattata con un farmaco antivirale.
Eseguire una diluizione seriale del campione per creare una sequenza di concentrazioni di virus decrescenti.
La diluizione ottimale previene l'infezione di una singola cellula da parte di più virus.
Introdurre i campioni diluiti in un monostrato di cellule ospiti e incubare.
Il virus si attacca al recettore della cellula ospite, entra nella cellula e ne avvia la replicazione. La cellula infetta lisi, rilasciando virioni.
Aggiungere la metilcellulosa, una sostanza viscosa che confina i virus nelle cellule vicine.
Successivamente, i virus causano la morte cellulare e la formazione di placche nella regione infetta.
Aggiungi metanolo per fissare le cellule.
Usa il cristallovioletto per colorare le cellule vive.
Osservare le placche come zone chiare che indicano cellule infette e morte cellulare, circondate da cellule non infette colorate di cristallovioletto.
Infine, contare il numero di placche alla massima diluizione per quantificare il titolo virale nella soluzione iniziale per determinare l'efficacia del farmaco antivirale.
Per quantificare la quantità di virus raccolta
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