Un'indagine sul flusso in vitro dell'effetto delle cellule stromali sul reclutamento dei leucociti

Prendiamo le camere di flusso preassemblate collegate a sistemi di flusso con filtri transwell: una con una monocoltura endoteliale sulla parte superiore e l'altra con una coltura endoteliale sulla parte superiore e cellule stromali sul fondo.

Entrambe le camere sono pretrattate con una citochina pro-infiammatoria.

In una monocoltura, le citochine attivano le cellule endoteliali, sovraregolando l'espressione della molecola di adesione.

Tuttavia, il cross-talk tra le cellule stromali ed endoteliali nella co-coltura porta le cellule stromali a produrre mediatori regolatori che riducono la risposta delle cellule endoteliali alle citochine pro-infiammatorie.

Posizionare la camera su un tavolino per microscopio a contrasto di fase invertito.

Introdurre una sospensione di neutrofili.

I neutrofili vengono reclutati e si legano alle molecole di adesione endoteliale tramite interazioni adesive transitorie, facilitando la loro interazione con le chemochine legate alla superficie e rotolando lungo l'endotelio.

Questa interazione attiva le integrine sui neutrofili, stabilizzando l'adesione e provocando la trasmigrazione attraverso le cellule endoteliali.

Tuttavia, nella co-coltura, la risposta