Rilevamento del disassemblaggio del biofilm attraverso un saggio di dispersione

Iniziare con una piastra multipozzetto contenente un biofilm batterico, ovvero batteri incapsulati all'interno della sostanza polimerica extracellulare protettiva o EPS.

Aspirare il terreno per rimuovere i batteri non aderenti e lavare.

Trattare i pozzetti contenenti biofilm con tampone da solo, tampone con glucosio, tampone con sali biliari o tampone con glucosio e sali biliari.

I trattamenti con tampone e glucosio supportano il rilascio di enzimi batterici che degradano l'EPS del biofilm.

Ciò si traduce nello smontaggio del biofilm, rilasciando i batteri.

Mentre i sali biliari e una combinazione di sali biliari e trattamenti con glucosio imitano le condizioni di stress e trattengono i batteri all'interno dell'EPS protettivo.

Trasferire il surnatante da ogni pozzetto in una piastra multipozzetto fresca.

Individuare i surnatanti diluiti su piastre di agar e incubarli.

Enumerare le colonie batteriche e determinare la dispersione batterica per ogni trattamento.

Una dispersione più elevata con trattamenti tampone e glucosio rispetto ai trattamenti con sali biliari indica lo smontaggio del biofilm.

Registrare i valori OD₆₀₀ dalla piastra di biofilm notturna sul lettore di piastre impos