Misurazione dell'efficienza fagocitaria dei macrofagi con la primachina e la terapia fotodinamica

Inizia con una piastra a più pozzetti contenente macrofagi murini aderenti o cellule immunitarie fagocitiche.

Introdurre una sospensione cellulare fungina di Cryptococcus, interagendo con i recettori dei macrofagi e internalizzando tramite fagocitosi.

Il fagosoma si fonde con il lisosoma, formando un fagolisosoma. L'ambiente acido del fagolisosoma favorisce la sopravvivenza e la moltiplicazione dei funghi.

Introdurre un'alta concentrazione di primachina, un fotosensibilizzante, nei pozzetti di prova, mentre il controllo manca del fotosensibilizzante. Incubare per facilitare l'assorbimento della primachina da parte dei macrofagi.

Esporre la lastra alla luce ultravioletta per il trattamento fotodinamico o PDT.

Nel pozzetto del test, la primachina forma cationi radicali che interagiscono con l'ossigeno molecolare, producendo specie reattive dell'ossigeno, o ROS.

I ROS inducono la morte fungina, mentre gli enzimi antiossidanti dei macrofagi neutralizzano i ROS, prevenendo il danno cellulare.

Permeabilizzare i macrofagi, rilasciando le cellule fungine.

Distribuire il contenuto cellulare diluito su piastre di agar selettive, ottenendo colonie fungine distinte.

Un minor numero di colonie