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Immunologia
0 visualizzazioni • 2:26 min • July 8th, 2025
Prendiamo un topo immunocompromesso che possiede solo neutrofili e monociti come cellule immunitarie funzionali.
Iniettare per via intraperitoneale la ciclofosfamide, un farmaco che prende di mira le cellule progenitrici immunitarie.
Il farmaco entra nelle cellule progenitrici immunitarie che proliferano attivamente e lega gli acidi nucleici, causando la morte cellulare. La morte delle cellule progenitrici porta alla deplezione delle cellule immunitarie.
Somministrare per via orale disulfiram, un farmaco che forma un addotto con la ciclofosfamide, riducendo gli effetti collaterali indotti dalla ciclofosfamide.
Iniettare per via sottocutanea una miscela di cellule tumorali umane e cellule mononucleate del sangue periferico, o PBMC, in un'adeguata miscela proteica gelatinosa.
La miscela proteica forma un gel, imitando la matrice extracellulare fisiologica, e intrappola le cellule tumorali.
La deplezione funzionale delle cellule immunitarie consente alle cellule tumorali di proliferare e formare nuovi vasi sanguigni, trasformandosi in uno xenotrapianto tumorale solido.
Contemporaneamente, le cellule T delle PBMC iniettate si infiltrano nel tumore.
Lo xenotrapianto tumorale mostra cellule T di crescita e infiltranti il tumore, stabilendo un modello murino di xenotrapianto umanizzato.
Per la deplezione delle cellule mieloidi, somministrare per via intraperitoneale 100 milligrammi per chilogrammo di ciclofosfamide e somministrare per via orale 125 milligrammi per chilogrammo di disulfiram a topi femmina NOD/SCID di età compresa tra 6 e 8 settimane una volta al giorno per due giorni. 24 ore dopo la seconda dose di ciclofosfamide e disulfiram, risospendere 5 x 106 PBMC umani appena isolati e 2,5 x 106 cellule della linea cellulare tumorale umana in 200 microlitri di PBS più il 50% di matrigel per animale, e iniettare l'intero volume per via sottocutanea nel fianco destro di ciascun animale da esperimento. Misurare e registrare il volume del tumore primario 2 volte a settimana per 4-6 settimane.