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Immunologia
0 visualizzazioni • 2:12 min • July 8th, 2025
Inizia con un topo femmina anestetizzato in posizione supina, portatore di tumori uroteliali nell'epitelio della vescica.
Fissare le zampe posteriori, individuare l'apertura uretrale e inserire un catetere nella vescica del topo. Lavare la vescica per rimuovere l'urina.
Iniettare la proteina attivante i neutrofili Helicobacter pylori, o HP-NAP, una proteina batterica immunomodulatrice.
Nel microambiente tumorale, HP-NAP interagisce con i recettori Toll-like sui neutrofili e avvia una cascata di segnalazione, aumentando l'espressione di citochine proinfiammatorie.
Le citochine innescano la differenziazione dei linfociti T naIve in linfociti T helper di tipo 1, o Th1, e citotossici di tipo 1, o Tc1, che producono interferone-gamma.
L'interferone-gamma inibisce la formazione di nuovi vasi sanguigni, limitando la disponibilità di nutrienti e ossigeno per il tumore.
Inoltre, sovraregola le molecole MHC che presentano l'antigene tumorale sulle cellule tumorali, facilitando l'interazione con le cellule Tc1.
Questa interazione provoca il rilascio di molecole citotossiche che inducono la morte delle cellule tumorali, dimostrando l'efficacia antitumorale di HP-NAP.
Almeno tre giorni dopo l'iniezione delle cellule MB-49, dopo aver anestetizzato l'animale, cateterizzato come appena dimostrato e utilizzando una siringa da 1 millilitro con 200-300 microlitri di PBS sterile, lavare l'urina residua dalla vescica, aspirando tutto il liquido.
Iniettare 50 microgrammi di proteina attivante i neutrofili Helicobacter pylori, o HPNAP, per 150 microlitri di PBS nella vescica, lasciando la siringa attaccata al catetere per evitare perdite. Dopo un'ora, rimuovere delicatamente il catetere dall'uretra e posizionare il topo in una gabbia sotto una lampada riscaldante fino al suo risveglio.