Soppressione della replicazione del virus dell'epatite B utilizzando cellule T virali antigene-specifiche

0 views • 2:50 min • July 8th, 2025

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Prendi le cellule T con recettori che si legano agli antigeni del virus dell'epatite B, o HBV.

Iniettare le cellule T nella vena caudale di un topo.

Consentire alle cellule iniettate di diffondersi nel fegato.

Per imitare l'infezione virale, assumere plasmidi che trasportano il genoma dell'HBV.

Iniettare rapidamente i plasmidi nella vena della coda, dirigendo i plasmidi nel fegato.

La forza del liquido permeabilizza l'endotelio del vaso e genera pori temporanei nelle cellule.

I plasmidi entrano nella cellula e subiscono la sintesi dell'RNA, producendo mRNA che viene utilizzato per la produzione di proteine virali.

Alcune di queste proteine agiscono come antigeni virali.

Le molecole presentanti l'antigene trasportano gli antigeni virali sulla superficie cellulare, esponendoli alle cellule T.

Queste cellule immunitarie interagiscono con gli antigeni virali e avviano meccanismi per eliminare le cellule infette, inibendo l'assemblaggio e la diffusione delle proteine virali.

Per la somministrazione idrodinamica del plasmide HPV attraverso la vena caudale, diluire 10 microgrammi di plasmide HPV in un equivalente dell'8% della massa corporea di PBS. Caricare il plasmide in una siringa da 3 millilitri dotata di un ago da mezzo pollice calibro 26 per topo.

Riscalda i topi HHD sotto una lampada termica per cinque minuti per dilatare le vene della coda e tira con cura un topo in un sistema di ritenuta di plastica. Individuare una vena caudale laterale dilatata nel terzo medio della coda e inserire l'ago parallelamente alla vena per erogare l'intero volume di plasmide attraverso la vena caudale in un periodo da tre a cinque secondi.

Per il trasferimento di cellule T CD8-positive derivate da antigene virale iPSC-specifiche, raccogliere le cellule T CD8-positive iPSC il giorno 22 di coltura come dimostrato e seminare le cellule su un nuovo piatto di coltura cellulare da 10 centimetri.

Dopo 30 minuti nell'incubatore per colture cellulari, filtrare le cellule galleggianti attraverso un colino di nylon da 70 micrometri e contare le cellule vitali. La diluizione si vende a una concentrazione di PBS di 1,5 x10,7 cellule per millilitro.

Iniettare 200 microlitri di cellule in singoli topi HHD di età compresa tra quattro e sei settimane nella vena caudale, come appena dimostrato. Il giorno 14 dopo il trasferimento cellulare, eseguire una somministrazione idrodinamica di plasmidi HPV come dimostrato.

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Last updated: 18 July 2026