Immunizzazione intranasale con BCG in un modello murino

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Iniziare con un topo anestetizzato e somministrare un ceppo vivo attenuato di BCG di Mycobacterium bovis, che ha una ridotta capacità di causare la malattia, attraverso il naso del topo.

I batteri iniettati stimolano una risposta immunitaria nel tessuto polmonare e nei linfonodi vicini.

Questo porta alla generazione di cellule T effettrici e cellule B che entrano nella circolazione del topo.

Le cellule B effettrici producono anticorpi contro i micobatteri.

Nel frattempo, le cellule T effettrici si depositano nel tessuto polmonare come cellule T di memoria residenti o celluleT RM, fornendo un'immunità a lungo termine.

Per valutare l'efficacia dell'immunizzazione, somministrare micobatteri vivi e virulenti con capacità di causare malattie attraverso il naso del topo.

Questo innesca l'attivazione delle cellule TRM nel tessuto polmonare.

Le cellule TRM attivate rilasciano citochine, attirando altre cellule immunitarie, comprese le cellule B effettrici.

Queste cellule B secernono anticorpi che si legano ai micobatteri, migliorando la loro eliminazione da parte dei neutrofili, indicando un'immunizzazione di successo.

Per la somministrazione intranasale, caricare una micropipetta con 20 microlitri di sospensione BCG e posizionare il topo anestetizzato in posizione supina all'interno del cappuccio. Somministrare l'inoculo goccia a goccia tra le due narici fino a quando l'intero volume di 20 microlitri non è stato depositato, lasciando il tempo tra le gocce per consentire al topo di inalare la sospensione. Quindi, ricaricare la micropipetta con altri 20 microlitri di batteri e ripetere la somministrazione.

Per il test di provocazione intranasale con il ceppo H37Rv Mycobacterium tuberculosis, al momento sperimentale appropriato dopo la vaccinazione, inoculare gli animali con somministrazione intranasale di 40 microlitri della sospensione batterica H37Rv come appena dimostrato.