Un modello tridimensionale di co-coltura di cellule T infiltranti negli sferoidi tumorali

Inizia con una piastra di coltura contenente un calco di agarosio. Il calco comprende una camera di semina con più micropozzetti.

Ogni micropozzetto contiene uno sferoide tumorale in un terreno di coltura. Gli sferoidi sono aggregati tridimensionali di cellule tumorali.

Per prima cosa, rimuovi il terreno che circonda il calco di agarosio. Quindi, rimuovere il terreno all'interno del calco da un angolo della camera di semina per evitare la perdita di sferoidi.

Introdurre una sospensione di cellule T tumore-specifiche goccia a goccia nella camera di semina, consentendo alle cellule di depositarsi nei micropozzetti contenenti gli sferoidi.

Successivamente, aggiungere un terreno di coltura attorno al calco di agarosio e incubare la piastra in condizioni fisiologiche per sviluppare una co-coltura.

Durante l'incubazione, le cellule T circondano lo sferoide. Un sottoinsieme di cellule T si infiltra nello sferoide, mentre altre rimangono nella periferia, stabilendo un modello di co-coltura tridimensionale.

Per impostare una co-coltura di cellule T, risospendere il numero appropriato di cellule T in 190 microlitri di un terreno di coltura di cellule T appropriato per pozzetto e inclinare la