Un metodo per il trattamento ad alto contenuto di sale delle cellule dendritiche e il loro trasferimento adottivo nei topi

Iniziare con una piastra a più pozzetti contenente una sospensione di cellule dendritiche o DC.

Per imitare una condizione ipertensiva, aggiungere un terreno di coltura contenente un'alta concentrazione di ioni sodio e incubare.

Durante l'incubazione, gli ioni sodio entrano nella cellula, aumentando la concentrazione intracellulare di sodio.

Questo innesca lo scambio di ioni sodio intracellulari con ioni calcio extracellulari.

L'aumento dei livelli interni di calcio attiva percorsi che facilitano la generazione di aldeidi reattive, che si legano alle proteine cellulari. Questo attiva le DC, che mostrano queste proteine modificate sulla loro superficie.

Dopo l'incubazione, raccogliere le cellule in una provetta e centrifugare.

Rimuovere il surnatante. Aggiungere un nuovo tampone per risospendere le celle.

Aspirare la sospensione cellulare in una siringa.

Prendi un topo anestetizzato e inietta la sospensione cellulare per via retroorbitale, che è un'area dietro l'orbita.

Questo processo di iniezione di cellule immunitarie attivate è chiamato trasferimento cellulare adottivo.

Pipettare 900 microlitri di sospensione CC in una piastra Falcon a fondo piatto piatto a 24 pozzetti. Aggiunge