Perché l'iniezione intradermica è importante per la somministrazione dell'antigene negli studi sui vaccini?

L'iniezione intradermica mira le cellule presentanti l'antigene nel derma, potenziando l'attivazione immunitaria e consentendo risposte locali misurabili, come la formazione di papule, per la validazione del saggio.

In che modo l'attenuazione della radiazione degli sporozoiti favorisce la valutazione della risposta immunitaria?

L'attenuazione della radiazione rende gli sporozoiti non infettivi pur preservando la struttura antigenica, consentendo una valutazione sicura dell'attivazione immunitaria senza patogenicità.

Cosa indica la formazione di papule dopo l'iniezione intradermica di un antigene?

Una papula visibile conferma la corretta somministrazione intradermica e si correla con l'attivazione immunitaria localizzata, fungendo da parametro di successo della procedura.

Perché vengono utilizzati più siti di iniezione in entrambe le orecchie durante la vaccinazione?

Più iniezioni bilaterali aumentano l'esposizione all'antigene e il reclutamento delle cellule immunitarie, migliorando la robustezza e la riproducibilità del rilevamento della risposta immunitaria.

In che modo il monitoraggio del recupero dopo l'iniezione influisce sulla qualità dei dati negli studi sull'immunizzazione?

Il monitoraggio del recupero garantisce il benessere animale e riduce la variabilità immunologica indotta dallo stress, favorendo misurazioni della risposta immunitaria costanti e affidabili.

Immunizzazione intradermica con sporozoiti vivi attenuati in un modello murino

JoVE Encyclopedia of Experiments

Immunologia

0 visualizzazioni • 2:19 min • July 8th, 2025

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Inizia con un topo anestetizzato sotto uno stereomicroscopio, con la parte inferiore di una delle orecchie del topo fissata sul tavolino tramite nastro adesivo.

Gli occhi sono rivestiti con un unguento per evitare che si secchino.

Porta una siringa caricata con lo stadio sporozoite di Plasmodium, un parassita della malaria. Gli sporozoiti vivi sono attenuati dalle radiazioni per renderli non infettivi.

Utilizzando lo stereomicroscopio, iniettare nella parte superiore dell'orecchio, penetrando nello strato più esterno dell'epidermide e rilasciando gli sporozoiti nel derma.

Tenere brevemente l'ago in posizione per evitare il riflusso della sospensione iniettata prima di rimuoverla.

Un gonfiore visibile nel sito di iniezione, chiamato papula, conferma l'avvenuta iniezione.

Eseguire più iniezioni nello stesso orecchio.

Rilasciare l'orecchio iniettato e ripetere le iniezioni nell'altro orecchio.

Dopo l'iniezione, lasciare che il topo si riprenda.

Gli sporozoiti iniettati innescano una risposta immunitaria, innescando il sistema immunitario contro il parassita.

Prima di iniettare gli sporozoiti, confermare il corretto livello di sedazione dell'animale da esperimento pizzicando le dita dei piedi e applicare un unguento per gli occhi per prevenire l'essiccazione corneale. Quindi, lavorando rapidamente, utilizzare del nastro adesivo trasparente per fissare delicatamente il lato ventrale del padiglione auricolare sotto uno stereomicroscopio e caricare una siringa da 10 microlitri dotata di un ago calibro 35 con 0,6 microlitri di parassiti risospesi.

Quindi, inserire con cautela l'ago, con il lato smussato rivolto verso l'alto, sotto l'epidermide sul lato dorsale dell'orecchio e iniettare 0,15 microlitri di sporozoiti nel sito. Si osserverà una papula caratteristica nel sito di iniezione. Dopo aver iniettato il derma altre tre volte, come appena dimostrato, rimuovere con cautela il nastro adesivo e monitorare il mouse fino a quando non si è completamente ripreso.